Основний фермент, що бере участь у регуляції гліколізу фосфофруктокіназаВін каталізує утворення нестабільної двофосфатної молекули – фруктозо-1,6-бісфосфату 4start superscript, 4, end superscript.
Регуляція гліколізу здійснюється на етапах незворотних реакцій (гексокіназна, фосфофруктокіназна, піруваткиназна). Оскільки основне значення гліколізу полягає у синтезі АТФ, його швидкість корелює із витратами енергії в організмі. Показником споживання у клітинах АТФ є накопичення АДФ та АМФ.
Реакція гліколізу у сумарному вигляді має такий вигляд: Глюкоза + 2НАД+ + 2АДФ + 2Pi → 2 піруват + 2НАД*H + 2Н+ + 2АТФ + 2Н2O. Кисень не потрібний для протікання гліколізу. В аеробних умовах піровиноградна кислота далі декарбоксилюється, з'єднується з коферментом А і залучається до циклу Кребса.
Гліколіз протікає у два етапи: 1) підготовчий етап – перетворення гексоз (глюкоза та фруктоза); 2) етап, пов'язаний із синтезом АТФ. Чотири з десяти реакцій гліколізу каталізують кінази, що переносять фосфатну групу з АТФ на субстрат, а також зворотні реакції – Перенесення фосфату на АДФ.